Microfluidics Devicesマイクロ流路デバイス
TL Genomicsのマイクロ流路デバイスは、多層構造という特徴を持っています。一般的なマイクロ流路デバイスは単層(1層)ですが、私たちのマイクロ流路デバイスは多層に積層されており、そのため供する試料の処理量が格段に増え、背圧が低減され高速での送液が可能になるというアドバンテージがあります。また、目詰まり防止技術の発明に成功し、血液試料を長時間連続で送液することを可能にしました。
画期的な積層構造と目詰まり防止技術
TL Genomicsのマイクロ流路デバイスは、水力学的ろ過の原理を採用して細胞を分離しています。この原理の利点は、その他の流体力学を応用した無標識細胞分離法に比べて、圧倒的に分離性能が高いことが挙げられます。
TL Genomicsでは、多孔質素材に血液の目詰まり成分を吸着させる「目詰まり防止技術」を発明しました。マイクロ流路デバイスに血液試料を流すと、微細流路の内部で血液成分が目詰まりを起こすことが知られており、これまでは血液試料をマイクロ流路で分離するには密度勾配遠心分離などの何らかの前処理が必須と考えられてきました。私たちの技術で、その大きな課題を解決することができました。
このマイクロ流路デバイスはオートクレーブ滅菌が可能で、分画操作は無菌的に行うことができ、得られた細胞はその後長期にわたり培養することができます。マイクロ流路デバイスで分離したリンパ球は、従来の密度勾配遠心で得られたPBMCと異なり、血小板やデブリの混入が無いことも特徴の一つです。
短時間で腫瘍組織から腫瘍浸潤リンパ球TILを分離する
このマイクロ流路デバイスは、組織に由来する細胞の回収や、微量なマウス/ラットの末梢血からの血球の回収にも優れた性能を発揮します。
酵素処理などを経て得られた組織由来細胞群は、細胞デブリや結合組織の破片を含んでいます。マイクロ流路デバイスを用いたサイズ分画により、それら不要な成分を除去したピュアな細胞は、その後の細胞アッセイに高い感度を示します。無標識で行う細胞の回収は、例えば腫瘍浸潤リンパ球(TIL: Tumor Infiltrating Lymphocytes)の研究分野で注目を浴びています。
TILを分離する実験としてマウスの大腸癌Colon26の細胞分離実験を行いました。マウスから腫瘍を取り出し、酵素処理して細胞懸濁液を抽出します。この実験では生理食塩水で10mLに希釈したマウス細胞懸濁液をマイクロ流路デバイスで分離して、小（～6μm）中（7µm～12µm）大（13µm～）の3種類に分けました。小さな細胞群には細胞片、ゴミなどが集まり、中間のサイズにはTILが濃縮されています。大型の細胞群には癌細胞や組織由来細胞が含まれています。このマイクロ流路デバイスを使用する事により、無標識でTILを分離する事ができることが明らかになりました。
